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品牌 | IPHASE | 货号 | 082A01.11/082A01.12 |
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规格 | 5million | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 免疫调节,分选T细胞,B细胞 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业,制药 |
人外周血单个核细胞 Human PBMC
外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是指外周血中具有单个细胞核的细胞,包括淋巴细胞,单核细胞等。
提取方法:
全血样本聚蔗糖-泛影葡胺(Ficoll-Hypaque)密度梯度离心分离
其他种属PBMC
猴外周血单个核细胞 Monkey PBMC
大鼠外周血单个核细胞 Rat PBMC
小鼠外周血单个核细胞 Mouse PBMC
比格犬外周血单个核细胞 Dog PBMC
猪外周血单个核细胞 Minipig PBMC
兔外周血单个核细胞 Rabbit PBMC
外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC),是指外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞(Lymphocyte)、单核细胞(Monocyte)、树突状细胞(DC)和其他少量细胞。PBMC可利用健康人或动物供体的外周血,通过Ficoll密度梯度离心,磁珠分选等步骤获得,主要包括淋巴细胞和单核细胞。
Ficoll是蔗糖的多聚体,中性,平均分子量400,000,当密度为1.2g/mL,未超出正常生理性渗透压,也不穿过生物膜。红细胞、粒细胞比重大,离心后沉于管底;淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重,离心后漂浮于分层液的液面上,也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞,就可从外周血中分离到单个核细胞。
人外周血单个核细胞 Human PBMC
不同细胞类型的比例
PBMC中大部分都是淋巴细胞,包括B细胞和T细胞,其中CD3 T细胞又占了淋巴细胞中绝大部分(45-70%)。这些T细胞都处于初始(naive)状态,即已经成熟了但没有受到抗原刺激。 在正常人中,只有非常小的一部分初始T细胞会因抗原识别而被激活。同样的B细胞也都处于初始状态。相对于淋巴细胞,单核细胞的比例在10-30%,收到刺激之后会发育成树突状细胞(DC)或巨噬细胞。干细胞的比例非常低,只有0.1-0.2%,因此很难从全血样本中分离到。
细胞运输与保存
(1)干冰运输,收到细胞后立即转入液氮冻存或直接复苏;
(2)T25瓶运输细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存,具体操作步骤见细胞培养步骤。
PBMC收到后注意事项:
(1)收到PBMC细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时反馈。
(2)先不打开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放培养箱静置四小时,稳定细胞状态,切忌在温箱内静置过夜。
(3)静置后镜检,拍照,记录细胞状态。建议传代后也拍照记录细胞生长情况。
(4)贴壁细胞:若细胞密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,收集细胞瓶内的培养基,留8ml继续培养至80%左右再传代,瓶盖可稍微拧松。
(5)细胞瓶内的培养基含血清和双抗,可收集后4℃保存备用,可补加2%血清。刚开始传代时建议一半用细胞瓶内的培养基,一半用自备的培养基,使细胞逐渐适应培养条件,以免因不适应而造成生长状态不佳。
(6)细胞胰酶消化液建议使用PBS配制。
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