单克隆抗体定制

单克隆抗体多克隆抗体定制

1. 重组蛋白定制
（1）原核表达系统：
将克隆化基因插入合适载体后导入原核生物用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。主要包括：大肠杆菌表达系统、枯草芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统等，其中应用广泛的是大肠杆菌表达系统。    
（2）酵母表达 ：
酵母表达系统是研究真核蛋白质表达和分析的有力工具，拥有转录后加工修饰功能，适合于稳定表达有功能的外源蛋白质。与昆虫表达系统和哺乳动物表达系统相比，酵母表达系统操作简便，成本低廉，可大规模进行发酵。
（3）哺乳动物细胞表达：
哺乳动物细胞表达系统的优势在于能够指导蛋白质的正确折叠，提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能，因而表达产物在分子结构、理化特性和生物学功能方面接近于天然的高等生物蛋白质分子。
目前已有许多重要的蛋白及糖蛋白利用哺乳动物细胞表达系统大量制备、生产。如：人组织型血纤蛋白酶原激活因子、凝血因子Ⅷ、干扰素、乙肝表面抗原、红血球生成激素、人生长激素等。

2. 单克隆抗体制备
抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构，叫做抗原决定簇，抗原通常是由多个抗原决定簇组成的。单克隆抗体是针对专一的抗原决定簇产生的抗体，主要原理是利用产生抗体的B淋巴细胞与肿瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞，来生产抗体。 

3. 多克隆抗体制备
抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构，叫做抗原决定簇，抗原通常是由多个抗原决定簇组成的，由多种抗原决定簇刺激机体，相应地就产生各种各样的单克隆抗体，这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体，机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;同样一类抗原决定簇，也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。

4. 蛋白纯化
包涵体变复性
亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、疏水层析纯化规模：毫克-克级
蛋白除菌、除内毒素
蛋白冻干