微核试验的应用与方法

　　微核试验是检测染色体或有丝分裂器损伤的一种遗传毒性试验方法。无着丝粒的染色体片段或因纺锤体受损而丢失的整个染色体，在细胞分裂后期仍留在子细胞的胞质内成为微核。

　　

　　目的：化学物质遗传毒性评价。

　　

　　原理：通过染色体丢失或断片形成而出现的微核检测染色体异常。

　　

　　步骤与结果：常用的是啮齿类动物骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验。以受试物处理啮齿类动物，然后处死，取骨髓，制片、固定、染色，于显微镜下计数PCE中的微核。如果与对照组比较，处理组PCE微核率有统计学意义的增加，并有剂量-反应关系，则可认为该受试物是哺乳动物体细胞的致突变物。

　　
 

　　用微核试验来评价药物、放射线、有毒物质等对人体细胞或体外培养细胞遗传学损伤仍是一个直观有效可行的方法,在遗传毒理、医学、食品、药物、环境等诸多方面得到了广泛的应用。微核计数经济,迅速,简便,不需要特殊技能,可以统计更多的细胞并实现计算机自动计数。若采用核型稳定的细胞,确立统一的操作协议,进行实验室间的合作建立数据库,应用探针技术的微核试验很可能被纳入遗传毒理学试验。微核试验技术的种类很多，包括常规微核试验、细胞分裂阻滞微核分析法、荧光原位杂交试验与DNA探针与抗着丝粒抗体染色等方法。

　　

　　1、动物体内细胞微核：主要有骨髓嗜多染红细胞微核试验；外周血淋巴细胞微核试验。

　　

　　2、细胞培养微核试验；

　　

　　3、蚕豆根尖微核试验：实验所用的蚕豆为松滋青皮豆，通过浸种、催芽、染毒、恢复培养、固定、孚尔根染色等步骤后，进行镜检。