ELISA试剂盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。
试剂盒种类多样,那么你怎么在众多试剂盒中区别真假试剂盒呢?
购买前:
1.选择正规公司进口试剂盒尽量选择大公司;国产试剂盒一定要选择大型正规企业,这个反映的不仅是产品质量的问题,对供应商的售前售后服务也是一个非常严格的检验。
2.产品的文献引用特别是高质量的SCI文章的引用是很多用户都关心的问题,这是业界对产品认可的一个非常重要指标,而且对相关用户的科研有一定的借鉴作用。
3. 过硬的冷链物流体系
目前冷链物流体系已经非常成熟,各家供应商一般都能保证抗体的低温运输。对于供应商而言,主要是舍得投入,好的抗体供应商在抗体收到后,一般冰盒还能坚持2-3天,足以让使用者安心实验。
4. 正规的销售(直销/分销)渠道
在国内,销售渠道是问题突出的关键环节,尤以假抗体试剂为甚,很多产品在包装上其实是可以辨别的(科研工作者很少关注,往往以价格为导向)。在利益的驱使下,部分经销商经常会自己制作抗体试剂,贴上假标签以次充好;另一个很普遍的现象是从正规渠道购得抗体试剂,通过小作坊稀释分装后,再出售给科研工作者。无论是以次充好,还是稀释分装,都会给科研工作者都带来很多实验风险。
5. 不常见指标的选择如需检测不常见物种的样本(如禽类、猪、羊等),可选择靠谱的生物网站或ELISA试剂盒供应商。其实,“货比三家”有时会有一些“惊喜”,也许你会发现:某个公司的说明书除了指标名称不一致,其他内容基本一样;某个指标,几家公司试剂盒的性能参数*一样…一定要记住:关于网上宣传有所有种属所有指标ELISA试剂盒的公司,那真的是再谨慎也不为过。
6. 所有指标常备现货抗体并不十分稳定,针对非热门研究指标,厂家为保证产品质量通常不会长期备现货,若承诺相对冷门的ELISA试剂盒能随时发货,那需谨慎考虑是否要选择该供应商。
购买后:
1.检查检查说明书、包装盒的质量,通常假伪劣产品为了降低成本,印刷的质量会比较差。其次仔细阅读说明书,查找ELISA的性能指标。
2.交叉实验鉴别
如果购买了两盒同一公司的ELISA试剂盒A和B,利用交叉实验即可鉴别ELISA试剂盒是否造假,方法如下:
(1) 取出购买的试剂盒A的包被板两条。
(2) 一条包被板加试剂盒A的标准品做标准曲线。
(3) 另一条包被板加试剂盒B的标准品做标准曲线。
(4) 后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物。
(5) 实验完毕后,检测两条标准曲线,如果两条标准曲线一致则说明两个ELISA试剂盒检测的同一个指标而非A和B,即该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。
(6) 如果两条标准曲线不一致则说明两个ELISA试剂盒检测的不同指标,试剂盒A只能检测A,不能检测B,即该试剂盒为正常的ELISA试剂盒。
3.干扰实验鉴别
利用干扰实验即可鉴别ELISA试剂盒是否检测目的抗原,方法如下:
(1) 将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液
(2) 37℃孵育15分钟后,代替原试剂盒中的检测抗体
(3) 后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物
(4) 实验完毕后,检测其标准曲线,如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配,试剂盒检测抗体针对的是非目的抗原,该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。
(5) 如果标准曲线无线性,则说明试剂盒检测抗体已被目的抗原中和或干扰,影响了其实际试剂盒抗体的检测作用,则该试剂盒检测抗体针对的是目的抗原。