简单介绍ELISA试剂盒的三种类型

　　试剂盒是用于盛放检测化学成分、药物残留、病毒种类等化学试剂的盒子。一般医院、制药企业使用。

　　ELISA大致分为五种类型：直接法、间接法、竞争法、夹心法、捕获包被法。在商品化试剂盒中用得比较多的是双抗体夹心法、竞争法和间接法。

　　夹心法

　　双抗体夹心法是夹心法中的一种主要形式，夹心法分为双抗体夹心法和双抗原夹心法：

　　双抗体夹心法中抗原的2个不同的抗原表位被两个抗体-捕捉抗体和检测抗体，分别结合。捕捉抗体固定于载体即酶标板上，检测抗体通过结合抗原进行显色分析。

　　应用于双抗体夹心法检测的捕捉抗体通常是单抗，偶尔有用多抗做为捕捉抗体的情况，但很少见，因为以多抗作为捕捉抗体容易出现交叉反应而降低特异性。

　　检测抗体通常为多抗，在商业化的科研试剂盒中经常用到生物素标记的山羊多抗，再让生物素标记的多抗与HRP标记的亲和素或者链霉亲和素结合，然后再加HRP也就是辣根过氧化物酶的底物，通常是TMB反应显色，这种方法是在传统的HRP酶标记抗体的双抗体夹心法ELISA中引入了生物素-亲和素放大系统。

　　竞争法

　　竞争法也是一种很常用的方法，一起看看：

　　竞争法是用样本中的游离抗体/抗原与固相的酶标抗体/抗原竞争性结合的分析方法。当游离抗体(或抗原)浓度越高，则能与固定抗原(或抗体)结合的酶标抗体(或抗原)就越少，后续显色就越浅，即与对照相比，显色越浅，表示检测样本中抗体(或抗原)含量越高。

　　该法特别适合小分子物质的检测也可用于检测比较不纯的样本，且重复性好，但是检测的灵敏度和专一性较差。竞争法测抗原常用于检测小分子抗原及半抗原，这类抗原通常缺乏两个以上的识别位点，不适用于双抗夹心法进行测定。该方法在商业化试剂盒中被广泛运用。

　　间接法

　　间接法只能用于测定抗体，主要用于疾病的诊断，其优点是只需要改变包被抗原，酶标抗体是通用的。间接法使用了二抗增加信号强度，也使抗体的选择多样化，然而间接法容易产生交叉反应。