细胞培养基的五种工艺流程帮你掌握大权

　　细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质，也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。

　　数百种成分的选择以及每种成分都可以从多种渠道来源获得。这导致了错综复杂的供应商网络和可能的变异性。考虑到这种复杂性，将从以下五点分析良好的培养基生产工艺。

　　01原材料的供应商管理

　　培养基成分中微量的微量元素杂质可能对最终培养基的组成产生累积影响，并影响细胞的多个信号通路，从而导致收获的蛋白质发生变异。例如，一些微量金属会影响糖基转移酶，并可能改变蛋白质的糖基化特性。同样，铜、锰、锌和硒等微量元素的浓度也会直接影响蛋白质质量。

　　不管微量金属是培养基配方中的特定成分还是杂质，微量成分都会产生不同的影响，其理想浓度可能根据特定的工艺而不同。为避免产品质量问题，生物制药公司必须了解金属元素在生物工艺中的影响。

　　因此，培养基生产商在选择供应商时，应该对产品进行充分表征。

　　02干粉研磨工艺

　　影响培养基稳定性的干粉研磨工艺

　　干粉研磨工艺是培养基稳定性的另一要素。该过程中的混合、研磨、冷却等方式选择、技术参数显著影响干粉性能。细胞培养基颗粒越细，同质条件下比表面积越大，其溶解性越好，而其成品细度是由物料的研磨过程直接决定。对于物料的研磨，针磨工艺是现阶段比较有优势的工艺，具有批量大、混合均匀等优点。

　　研磨过程中的冷却至关重要，物料在研磨过程中由于研磨速度较快会产生大量热量，非常容易被氧化，导致物料性状发生改变，从而影响培养基稳定性。

　　利用冷却水夹套进行降温是传统降温方式，但由于无法接触研磨的温度中心，会导致物料在内部高温的部位发生氧化等化学反应，甚至培养基粉末颜色会发生肉眼可见的加深。在干粉研磨工艺中通常采用液氮挥发出的冷却氮气随物料一起进入研磨过程进行冷却，产品颜色浅淡，氧化程度更低。

　　03培养基干粉颗粒化技术

　　培养基干粉颗粒化可以缩小干粉储存的体积，并且使得称量干粉变得更为方便。并且培养基干粉颗粒化可以大大缩小培养基搅拌溶解的时间，提高培养基配制效率。测试表明，相同质量的培养基，干粉溶解的时间为30 min，而颗粒溶解的时间仅为7 min。灌流工艺由于培养基用量显著增加，使得该技术在灌流工艺的培养基配制中优势更加明显。

　　04建立灵活的制造网络

　　生物制药企业在不同阶段对培养基用量的要求有所差异，而且目前越来越多的制药企业开始寻求定制化的培养基，因此良好的培养基生产商会拥有更小规模干粉培养基的试生产用于样品生产问题排除以及规模放大试生产。

　　05建立双重制造机制

　　随着生物制品制造商对其产品的商业化发展，防止中断的能力变得至关重要。良好的培养及生产是会让不同生产基地都采用相同的技术和可比较的工艺流程来提供细胞培养基，从而达到可重复的化学成分、粒径/体积密度、最终产品技术参数和细胞培养性能。通过使用相同的原材料、自动工艺控制、等效的验证标准和文档，可以进一步实现制造的一致性和连续性，从一个供应商实现双重采购。