TK 基因突变试剂盒的原理及优势

　　TK 基因突变试验的原理：
 

　　TK 基因突变试验的检测终点是 TK 基因的突变。TK 基因突变属于常染色体基因突变。
 

　　TK 基因的产物胸苷激酶在体内催化从脱氧胸苷(TdR)生成胸苷酸(TMP)的反应。在正常情况下，此反应并非生命所必需，原因是体内的 TMP 主要来自于脱氧尿嘧啶核苷酸(dUMP)，即由胸苷酸合成酶催化的 dUMP 甲基化反应生成 TMP。但如在细胞培养物中加入胸苷类似物(如三氟胸苷，即 trifluorothymidine，TFT)，则 TFT 在胸苷激酶的催化下可生成三氟胸苷酸，进而掺入 DNA，造成致死性突变，故细胞不能存活。若 TK 基因发生突变，导致胸苷激酶缺陷，则 TFT 不能磷酸化，亦不能掺 DNA，故突变细胞在含有 TFT 的培养基中能够生长，即表现出对 TFT 的抗性。根据突变集落形成数可计算突变频率，从而推断受试物的致突变性。在 TK 基因突变试验结果观察中可发现两类明显不同集落，即大/小集落(L5178Y 细胞)或正常生长/缓慢生长集落(TK6 细胞)，有研究表明，大集落/正常生长集落主要由点突变或较小范围的缺失等引起，而小集落/缓慢生长集落主要由较大范围的染色体畸变，或由涉及调控细胞增殖的基因缺失引起。
 

　　TK 基因突变试剂盒优势：
 

　　便捷—— 本试剂盒省去了诱导 S9 制备，阳性底物、筛选培养基的配制和浓度条件摸索的时间，可以直接使用，大大缩短了实验周期。
 

　　准确——本试剂盒各成分均经过严格的质量检测，无杂菌污染，诱导 S9 活性均符合 L5178Y 细胞基因突变试验要求，实验结果准确、可靠、重现性高。
 

　　稳定—— 本试剂盒稳定性强、易于运输和保存。